Hemos actualizado nuestro Política de privacidad para aclarar cómo usamos sus datos personales.

Usamos cookies para brindarle una mejor experiencia. Puede leer nuestro Política de cookies aquí.

Publicidad
Póster

Inducción de P450 en hepatocitos criopreservados de ratas knock-out del receptor nuclear PXR y CAR

Póster

Inducción de P450 en hepatocitos criopreservados de ratas knock-out del receptor nuclear PXR y CAR

Aquí, informamos el aislamiento y caracterización preliminar de hepatocitos criopreservados de ratas macho PXR y CAR knockout SD y ratas PXR / CAR double knockout SD Horizon Discovery - SAGE Labs. Tuvimos éxito en el aislamiento y criopreservaciónde los hepatocitos de los tres modelos knockout, produciendo hepatocitos con alta viabilidad > 80% y capacidad de meseta. Los hepatocitos criopreservados de ratas de tipo salvaje y knockout se cultivaron para la evaluación de la expresión génica en presencia y ausencia de ligandos PXR y CAR.Los hepatocitos criopreservados se recuperaron usando UCRM IVAL Inc. y se sembraron en placas recubiertas de colágeno de 24 pocillos. Los hepatocitos formaron cultivos de monocapa casi confluentes con morfología epitelial típica de hepatocitos de rata en cultivo primario. Después de cultivar durante la noche, el medio se cambió a inducción sin proteínasmedio para hepatocitos de rata RHIM, IVAL Inc.. Los hepatocitos se trataron al día siguiente con el ligando PXR pregnenlona-16α-carbonitrilo PCN y el ligando CAR 3,3ʹ, 5,5ʹ-tetracloro-1,4-bis piridiloxi benceno TCPOBOP.Nuestros resultados muestran que se requirió PXR para la activación de PCN de la expresión génica de Cyp2b2, Cyp3a23 / 3a1, Cyp3a18, Cyp2c11 y Slco1a2 Oatp1a2, y que se requirió CAR para la activación de TCPOBOP de la expresión génica de Cyp2b2 y Cyp3a23 / 3a1, en buen acuerdocon datos obtenidos de modelos in vivo de inactivación de ratas1, hepatocitos primarios humanos, líneas celulares inactivadas de receptores nucleares y modelos inactivos de ratón.Por tanto, los hepatocitos de las ratas knockout para PXR y CAR representan un complemento ex vivo útil para los modelos y herramientas in vivo para el desarrollo de fármacos, especialmente para estudios funcionales sobre rutas metabólicas que implican receptores nucleares.
Publicidad